单环刺螠生活史研究

有关单环刺发育周期的研究，国内外迄今未见专门报道。本文报道了烟台沿岸单环刺早期胚胎发育、各期幼虫形态标志、幼和成的形态特征的研究结果。     

单环刺螠Vasa基因的早期发育表达图式

Vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,是决定生殖系发育的重要调控因子之一。采用同源克隆策略及SMART-RACE技术,克隆了海洋经济螠虫动物单环刺螠Vasa基因的全长cDNA,该序列长4 080 bp,开放阅读框2 322 bp,编码733个氨基酸,具有DEAD-box蛋白家族共有的全部9个保守域。整体原位杂交和半定量RT-PCR结果显示,Vasa基因在未受精卵、受精卵、2～8细胞的早期胚胎中均有明显的表达,显示其母源性提供的特点;从囊胚开始,表达量明显降低,在原肠胚表达信号主要集中在内中胚层细胞中;至担轮幼虫,表达信号进一步集中在消化道处;当发育至体节幼虫时,阳性细胞分布于消化道和体节的隔膜处,进入蠕虫状幼虫,信号仅在头部的腹刚毛附近以及后肠周围的细胞中表达。实验结果为探知刺螠动物生殖系的起源和分化以及低等型生殖腺的发生提供重要的数据。     

单环刺螠增养殖生物学的研究

单环刺螠个体鲜出肉率大致为冬季39～47％,春季17～27％。食性为滤食性,以水中悬浮性颗粒为食。气温7℃,干露时间持续72h．均能成活。生活水温是0～30℃,临界高温32．5℃,临界低温-4℃。生活的盐度范围是15～36,适宜盐度范围24．94～35．77。pH值的耐受范围是4．46～9．5,适宜范围7.5～9．42。在溶解氧含量达1．14mg／L时,活动正常。     

pH、温度和盐度对单环刺螠消化酶和溶菌酶活力的影响

采用L25(56)正交试验法测定了不同pH(6、7、8、9、10)、温度(10、15、20、25、30℃)和盐度(15、20、25、30、35)对体质量为(71.2±8.5)g的单环刺螠肠蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶活力的影响,以及不同盐度对单环刺螠血液溶菌酶活力的影响。试验结果表明,单环刺螠肠消化酶活力的最适环境条件分别为,蛋白酶:pH 8、温度30℃、盐度35;淀粉酶:pH 9、温度25℃、盐度25;纤维素酶:pH6、温度30℃、盐度35;脂肪酶:pH 6、温度25℃、盐度30。盐度15和20两组单环刺螠血液溶菌酶活力均先降后升再降,而盐度30和35两组则先升后降。至处理第4d,各试验组溶菌酶活力依次为:盐度3025352015,盐度15和20两组溶菌酶活力显著低于盐度较高试验组(P0.05)。盐度25~35、pH 6~9为单环刺螠适宜的环境条件,高温(25~30℃)下其消化酶活力较高,而低盐度(15~20)下其消化酶活力和免疫能力明显降低。     

单环刺螠虫精子生物学特性和环境因子的关系

解剖成熟的单环刺虫(Urechis uniconctus)成体,直接从肾管中取出新鲜精子进行实验。结果显示,单环刺虫精子为鞭毛型,头部最前端为顶体,呈奶嘴状;细胞核近似杯状,核内有核泡。中段由一个大环状线粒体组成。尾部轴丝为典型的“9+2”型结构。精液的pH值为6.5±0.2;精子密度为(4.2±0.2)×109/mL;新鲜精子经过滤海水(10 cm厚的脱脂棉过滤)的激活率为86.4%±6.3%,涡动时间为(17.0±6.9)min,寿命为(24.4±7.8)min。室温(20±1)℃下,精子保存12 h活力无显著变化,但至24 h活力明显下降;低温(4℃)可明显延长精子活力的保存时间,可保存21 d;盐度和酸碱度对精子的激活率、涡动时间和寿命都有较大的影响,精子适宜的盐度为20~30,最佳盐度为25;适宜的酸碱度为7~9,最佳为8。因此,低温可以较长时间的保存单环刺虫的精子,在盐度稍低或偏碱性的海水中精子活力较高。     

氨氮及盐度对单环刺螠耗氧率的影响研究

在实验室条件下测定了盐度、氨氮对单环刺螠耗氧率的影响。单环刺螠耗氧率随时间的延长逐渐降低，两者之间呈二次多项式关系：OR=ax^2＋bx＋c；盐度对单环刺螠耗氧率的影响非常明显（p〈0．01），盐度在31时，各种规格单环刺螠的耗氧率达到最大值；单环刺螠的耗氧率与NH4^＋浓度呈明显幂函数关系：OR=ax^-b，经F检验总氨氮与体重对单环刺螠耗氧率的影响均达极显著水平（p〈0．01）。     

单环刺螠摄食节律的研究

为研究人工养殖条件下单环刺螠Urechis unicinctus的摄食节律,试验中将粉末状饲料与水按1∶10混合均匀后形成浊液,用分光光度法测定其浊度变化,通过计算每个时段投饵1 h后养殖水体因单环刺螠摄食造成浊度的改变值,来获得各时段单环刺螠的摄食强度。结果表明:单环刺螠不同时段的摄食强度具有极显著性差异(P0.01);一天中单环刺螠摄食最高峰出现在18:00,次高峰为6:00,且6:00、18:00两个时段的摄食强度显著高于其他时段(P0.05);摄食最低峰出现在3:00,次低峰为21:00,此2个时段的摄食强度显著低于其他时段(P0.05),单环刺螠摄食无明显的昼夜节律(P0.05)。本研究结果可为单环刺螠的投喂策略提供科学参考依据。     

单环刺螠生物学及生理学研究进展

单环刺螠是一种具有重要经济价值和潜在药用价值的海洋无脊椎动物.就单环刺螠对环境的适应性、消化道组织构成及配子发生、营养组分、代谢调节、分子生物学研究等方面进行了综述.     

单环刺螠受精过程的细胞学观察

利用组织学和荧光显微镜对单环刺螠(Urechis unicinctus)受精过程中精子入卵以及核相变化进行了观察.结果表明:单环刺螠成熟卵呈卵圆形,核相处于生发泡尚未破裂的第1次成熟分裂前期.在(21±1)℃时,精卵混合后约5 min,精子由卵偏向植物极一侧入卵,受精膜开举起,继而精核发生第1次膨胀.直至受精后约25 min,受精膜完全举起；受精后10～50 min,卵核相继完成二次成熟分裂,分别形成第一极体和第二极体；受精后50～70 min,精核卵核分别膨胀,形成雄原核和雌原核,进而相向迁移,最后在卵的中央联合形成合子核.受精后70～90 min,受精卵完成第1次卵裂,形成2个大小相等的卵裂球.单环刺螠受精全过程历时约70 min,略长于多数海洋无脊椎动物的受精持续时间.本研究旨在为今后单环刺螠人工育苗和新品种的培育提供基础资料.     

Effects of stocking density on the growth performance,physiological response and intestinal microbiota of juvenile Echiura worms (Urechis unicinctus)

Aquaculture of the Echiura worm Urechis unicinctus has developed rapidly in recent years. However, the artificial cultivation technology remains to be perfected. In this study, the effects of stocking density on the growth performance, physiological responses and intestinal microbiota of U. unicinctus juveniles were evaluated. Juvenile worms were randomly stocked at densities of 200 U (U. unicinctus/m³), 500 U, 1,000 U and 2,000 U, in aquariums. The results indicated that the contents of triglycerides, glucose, total cholesterol, lactic acid, alkaline phosphatase, acid phosphatase and aspartate transaminase in the coelomic fluid of U. unicinctus juveniles were significantly enhanced with increasing stocking density. The digestive enzyme activities increased with increasing stocking density from 200 U to 1,000 U, before exhibiting a significant decrease in the 2,000 U group. In contrast, the antioxidant capacity of U. unicinctus juveniles was suppressed under high stocking density conditions. In case of the intestinal microbiota of U. unicinctus juveniles, Actinobacteria were more abundant in the 200 U group; SJA15, Gluconobacter and OP81 were higher in the 1,000 U group; Burkholderiales and Limnohabitans were enriched in the 2,000 U group. The highest and lowest survival rates of the U. unicinctus juveniles were recorded in the 500 U and 200 U groups respectively, and high stocking densities negatively affected the individual growth performance. In summary, due to the highest survival rate and appropriate growth performance and physiological responses, 500 U was considered to be the optimal stocking density for the cultivation of U. unicinctus juveniles.